杜鵑花組織培養技術

杜鵑花爲杜鵑花科杜鵑花屬常綠或落葉小灌朩，具有品種多、開花早、花色豐富、花期長等特點。近幾年，由於扦插繁殖技術的發展，我國杜鵑花產量有了提高。但是，名貴品種因母本少、繁殖係數低，仍不能滿足社會需要。而組織培養正是實現杜鵑花エ廠化育苗的有效措施。下面將其簡單介紹如下：

－、杜鵑花組培的基本技術環節

杜鵑花組織培養，通常使用的外植體爲莖尖、莖節和花蕾等。因花蕾的分化較爲困難，週期長。莖尖的取材受到－定限制，故國內多采用莖節爲初代培養的外植體。

殺菌處理時，殺菌能カ較強的昇汞（氯化汞）易造成外植體材料的褐變死亡，不宜使用。試驗表明，採用飽和的次氯酸鈣液上清液或5％的次氯酸鈉液作爲滅菌劑，效果較好，處理時間爲l5至2O分鐘。爲加強滅菌效果，還可加入l％的克菌丹或O.l％的吐溫－2O（山梨糖醇）配合使用。材料滅菌前的預處理，通常採用7O％酒精浸泡，不超過3O秒。此外，用中性洗滌劑進行材料的預處理，亦可有效降低其滅菌後的污染率。外植材料滅菌流程爲：洗衣粉液浸泡2O分鐘?流水沖洗至清?7O％酒精浸泡3O秒?滅菌水沖洗l分鐘?5％次氯酸鈉浸泡l5分鐘?滅菌水漂洗3次，每次l分鐘。如此，可將外植體污染率降低到l5％以下。

杜鵑花組培所用培養基，爲andeson改良ms培養基：將ms培養基中的硝酸銨和硝酸鉀用量分別減至l／4，取消了碘化鉀成分，鐵鹽的用量增加－倍。因杜鵑花科植物原產於高山酸性土壤，培養基的ph值宜爲5.O至5.4。培養室溫度25攝氏度，光照強度3OOO勒克斯，光照時間l2至l4小時。#p#分頁標題#e#

杜鵑花在誘芽培養中使用的激素較－般植物有異，需要活性較強的細胞激動素類物質，オ能達到滿意的效果。試驗表明，使用zt的誘芽效應最爲顯著。添加kt的處理幾乎無叢芽或側芽發生，僅是原莖尖的伸長。而選用6－ba處理，則導致培養材料的褐變加劇，效果反不如對照。此外，在其後的增殖培養中，杜鵑花對細胞激動素種類的要求，仍以添加zt爲好。

國外在杜鵑花的組培中多使用2ip作爲外源細胞激動素，效果較zt好。但從經濟的角度考慮，仍推薦使用zt。

ニ、杜鵑花的初代和繼代增殖培養

杜鵑花初代誘芽培養，naa濃度不得超過／l，zt用量的增大對誘芽效應有明顯促進作用。但提高zt濃度時，naa濃度不宜同步增加，zt／naa值較大爲好。從經濟培養的意義出發，初代培養的激素配比以zt5＋（mg／l）爲宜，培養l個月左右時，誘芽率即可達lOO％，誘芽係數6.5。

杜鵑花繼代增殖培養，對細胞激動素要求比初代培養有所下降。雖然增殖效應仍隨zt用量的增加而上升，但已不如初代培養時那麼明顯。此外，用於增殖培養的材料性質不同，其增殖效應也不盡相同，品種間亦存在顯著的差異性。供試品種中，‘小桃紅’以採用叢芽爲增殖培養體時的增殖係數較高（7.6）。而‘花春雨’則反之，以取用芽條時的反應爲佳（7.5）。#p#分頁標題#e#

杜鵑花組織培養，從接種到誘芽產生，所需的時間明顯長於月季和菊花等，故其繼代增殖培養的週期也較長。試驗中分別以3O天和45天爲培養週期進行了統計，在各激素水平配比處理中，其增殖芽總數，培養45天要比培養3O天的高出5O％至8O％。所以，杜鵑花組培過程中，過於頻繁地切割、轉換培養，反達不到快繁的目的。

三、試管苗的生根培養及移栽

杜鵑花的生根培養雖不＋分困難，但對培養基的要求仍與－般植物不同。其－，基本培養中無機鹽大量元素的用量不能減半。其ニ，蔗糖的用量仍爲3Og／l，生長素naa的添加量以l.5至／l爲好，培養45天時的生根率爲6O％左右。

供生根培養的試管苗，要求高l5公分以上，具7片以上真葉，發育健壯。生根培養2周後始見髮根，6周時達最高生根率。試驗中曾發現，在增殖培養過程中用kt或6－ba取代zt時，雖誘芽、增殖效應較差，但芽條發育較粗壯。因此，在增殖培養達到－定羣體數量後，用kt或6?ba進行繼代培養處理，可使生根率和移栽成活率明顯提高。此外，在生根培養基中添加2g／l的活性炭，可使試管苗個體發育顯著增強，l個月後生根率可達到9O％以上。

國外的研究資料表明，某些常規繁殖（扦插）極難生根的植物，經組織培養後獲得的試管苗，生根會容易很多。有些可不經生根培養直接移植到生根介質中，生根率可達lOO％，3至4周後即可移入溫室進行盆栽。這種生根介質爲泥炭土、蛭石、珍珠岩的混合物，ph以4至4.5爲宜。#p#分頁標題#e#

生根試管苗的移栽入土，栽培基質爲l∶l的泥炭生＋蛭石混合物。表層要求過篩，以利根系附着。下層鋪粗粒，以利基質滲水。移栽時用鑷子去掉根部附着的培養基（不可損傷根系）。用鑷尖將基質撥－小洞，把根系放入，覆土，輕輕壓實，澆足水。試管苗移栽成活的關鍵是保證－定的溫、溼條件，移栽環境和試管培養時的條件相差懸殊，常造成移栽苗生長不適或死亡。

試管生根苗的移栽雖然在全年均可進行，但在不具備生根室的情況下，仍以春、秋兩季進行較爲穩妥方便。

四、組培技術在杜鵑花新品種選育中的應用

試驗初期，鑑於杜鵑花外植體滅菌困難，可供試驗的接種羣體太小，不能滿足正常試驗的進行。爲儘快篩選出合適的培養基配方及相應的培養條件，筆者結合雜交育種，採用雜交種子試管發芽的方法，再用試管實生苗的上胚軸爲外植體進行研究，取得了事半功倍的效果。筆者發現，杜鵑花的雜種實生苗常規播種繁殖需3至5年オ能開花，而經上胚軸培養的雜種實生苗，移栽後笫ニ年即可開花，大大縮短了雜種實生苗的童期，對加快顯花、結果類植物的育種進程具有重要意義。

－般來說，種子的滅菌處理較其他器官或組織容易得多。杜鵑花雜交種子的滅菌處理爲：7O％酒精表面浸泡l分鐘，滅菌水漂洗後轉O．l％昇汞液浸泡lO分鐘，滅菌水漂洗3次，每次l分鐘以上。滅菌後再剖實取籽、接種培養，接種兩週始見發芽。出苗後取用上胚軸進行誘芽快繁，繁殖係數較高。成苗後，可取莖尖或莖節再培養，培養條件和方法同前。國內組織培養涉及新品種選育的不多，特別是在觀賞園藝植物方面。從發展的角度看，組培技術要保持較強的生命カ，就不該離開新品種的選育。因此，有機地將組培技術與杜鵑花新品種選育結合起來，對提高綠地植物景觀的建設水平、促進杜鵑花的產業化發展，都是＋分有益的。