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花卉芽的增殖方法

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這一階段是快速繁殖技術最重要的一環。在這~階段潛在的植物個體(芽或胚狀體)通過側芽的形成和生長、外植體產生的愈傷組織上不定芽的形成和胚狀體發生三條途徑,在數量上得以迅速增殖。由於植物種類的不同,可採用不同的途徑。

花卉芽的增殖方法

(1)促進側芽的形成和生長:高等植物的每一個葉腋中通常都存在着腋芽,在一定條件下可使其生長。頂端優勢抑制側芽生長可被外源的細胞分裂素打破,所以在利用這條途徑時,在培養基中幾乎都要加入細胞分裂素(有時也同時加入少量生長素)。由於細胞分裂素的持續作用,側芽不斷分化和生長,逐漸形成芽叢。反覆切割並轉移到新的培養基中繼代培養,就可在短期內得到大量的芽。

有些植物即使在含有細胞分裂素的培養基中頂端優勢也不易被打破,接種的莖尖和芽只能長成不分枝的一根枝條,此時可用切段法(每切段帶有一個葉片)加以繁殖。

利用側芽的分化和生長使芽增殖的主要優點是能保持遺傳的穩定性,因爲莖尖的細胞常是均一的二倍體細胞,它不易受培養條件的影響而發生變異,它對於保持嵌合體的性狀也是一個好辦法。目前已有近百種植物可用這種方法進行快速繁殖,如蘋果、非洲菊、月季等。

在培養時培養基中加入的細胞分裂紊,一般濃度在O.I-IO毫克/升(多爲1-2毫克/升)。在幾種細胞分裂素中用得最多的是6-BA,其次是KT和異戊基腺甘。對於具體植物,使用細胞分裂素的種類和濃度可根據已有資料或通過試驗才能決定。

除了細胞分裂素外,在培養基中還經常加入低濃度的生長素以促進腋芽的生長,但要防止引起愈傷組織化。常用的生長素是NAA、IAA和IBA,使用濃度一般爲0.1-1毫克/升。另外在某些培養基中低濃度的赤黴素對促進側芽的伸長有效。

側芽的增殖除了和基本培養基、激素、外植體來源等有關外,有時還與繼代培養的次數有關,如蘋果、月季,隨着繼代培養次數的增加,側芽增殖的速度會逐漸提高。

(2)誘導不定芽的形成:從現存的芽之外的任何組織器官上通過器官發生重新形成的芽稱爲不定芽。在自然條件下有很多植物的器官可以產生不定芽,如蘋果樹的根、風信子的鱗片、秋海棠的葉等。在培養條件下,由於所需要的外植體極小,又加上激素的作用,可以使這種能力得到很好的發揮,如秋海棠的葉切段放在培養基中,可產生成千上萬個芽。在培養條件下還能使通常不產生不定芽的器官形成不定芽,如菊花的花器官和葉片,百合、水仙的鱗片,萱草的花莖等。

使用在外植體上形成不定芽的方法,要避免使用濃度過高的激素和2,4-D等活性極強的生長素,以防止遺傳變異的發生。不定芽也可在愈傷組織上產生,但如經過愈傷組織階段,特別是多次繼代的愈傷組織,不但器官分化能力會逐漸降低以至完全喪失,遺傳性也常難保持穩定。#p#分頁標題#e#

在誘導外植體上形成不定芽時,一般使用細胞分裂素濃度高於生長素濃度的激素配比。但也經常採用細胞分裂素和生長素的比值接近於1的配比。濃度範圍一般在0.1-10毫克/升。常用細胞分裂素種類是6-BA和KT,生長素種類是NAA、IAA和IBA。外源激素的供應只是一個方面,器官分化的性質還要決定於內源激素的狀況。對於不同的植物,使用的激素種類和濃度常有較大的變化,在具體操作時要進行試驗篩選才能找到適當的配比。

(3)誘導胚狀體的形成:在自然條件下,只有少數植物可以由珠心產生胚狀體,在培養條件下,現在已有上百種植物可以產生胚狀體。在誘導胚狀體形成時一般使用胚、分生組織或生殖器官作爲外植體。在一個含有豐富還原態氮的培養基上,在存在生長素,特別是2,4-D時誘導胚狀體的發生,然後轉移到降低濃度或沒有生長素的培養基上使胚狀體成熟和生長。

胚狀體途徑的優點是增殖率高,而且胚狀體是雙極性的,可以免去生根這一步。但是目前由於很多重要的作物還不能形成胚狀體,或產生的胚狀體難以形成植株或成苗率太低,除柑橘、咖啡等少數作物外都不採用這條途徑。

4.根的誘導:通過側芽和不定芽途徑產生的芽長成嫩枝後,必需誘導生根才能移植。草本植物一般比木本植物容易生根。木本植物中,幼態樹較成年樹產生的芽和嫩枝容易生根。由於嫩枝本身能合成豐富的生長素,所以一部分植物可以在無激素的培養基上生根,其它需要在培養基中加入適量的生長素(一般濃度在0.1-10毫克/升之間),使用最多的生長素是NAA,其次是IBA和IAA。

在生根階段除使用和第一階段相同的基本培養基外,也經常使用鹽度爲1/3或1/2水平的培養基。蔗糖濃度可降低到1%-1.5%,以增強植株的自養能力,爲此也常相應地提高光照強度(3000-10000勒克斯)。

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